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黃曲霉毒素免疫親和柱
嵐致黃曲霉毒素免疫親和柱
簡介
AFT免疫親和柱適用于基質(zhì)復(fù)雜,、低的樣品中黃曲霉毒素B1,，B2,，G1，G2檢測的凈化,?？梢赃M行TLC,、HPLC,、GC、LC-MS/MS,、EIA的定量分析,，適用于谷物，食品,，飼料等的樣品凈化過程,。
柱容量 約200ng 黃曲霉毒素
儲存條件 2-8℃冷藏保存，不可冷凍
嵐致黃曲霉毒素免疫親和柱
1 用途
用于實驗室凈化樣品提取物以進行進一步分析
2 概要
黃曲霉毒素是谷類及其他農(nóng)作物常見的霉變菌,，是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的一類低分子化合物,。污染糧食、油料作物的種子,，其中以花生,、玉米易被污染，另外在小麥,、高粱,、巴西堅果、豆類和大米等重要糧食中也經(jīng)常被檢出,。
黃曲霉毒素?zé)岱€(wěn)定性很高,，一旦產(chǎn)生便難以除去,。對動物、植物和微生物具有很強的毒性,，致癌力強,，還能引起突變和導(dǎo)致畸形。
黃曲霉毒素作為肝癌的三大誘因之一,，也是胃癌,，腸癌等疾病的主要原因，對人類的健康構(gòu)成很大威脅,。世界各國對食品,，飼料中的黃曲霉毒素都有嚴格的。
3 原理
測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),，免疫親和柱中含有和黃曲霉毒素抗體結(jié)合在一起的凝膠,，樣品中的黃曲霉毒素經(jīng)過提取、過濾,、稀釋,，然后緩慢的通過黃曲霉免疫親和層析柱，在免疫親和柱內(nèi)黃曲霉毒素與抗體結(jié)合,，其他的無關(guān)物質(zhì)不會結(jié)合而直接通過免疫親和柱,，之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結(jié)合的其他無關(guān)物質(zhì)。后加入甲醇將黃曲霉毒素釋放,，然后注入到分析儀器中進行進一步的檢測,。
4 提供的試劑
l 25支/盒免疫親和柱，規(guī)格：1ml/3ml
5 操作者應(yīng)注意事項
l 黃曲霉毒素對人體有害,，應(yīng)戴手套操作,。
l 使用過的玻璃容器及黃曲霉毒素溶液宜用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。
l 不要使用過了有效日期的免疫親和柱,。
l 親和柱于2-8℃冷藏保存,，不可冷凍
l 使用前，免疫親和層析柱需回至室溫（22~25℃）
6 操作流程（符合GB/T 18979-2003國標方法）
l 粉碎好的樣品過20目篩并在取樣前混合,，不立即分析的樣品應(yīng)放在冰箱中儲存,。
l 稱取20g粉碎樣品及4g氯化鈉，加入100ml 70%甲醇/水,。
l 高速均質(zhì)約2分鐘,，或震蕩器震蕩約30分鐘，
l 過濾樣品至少10ml,。
l 取10ml濾液加入20ml水,，混合。
l 用玻璃纖維濾紙過濾至澄清,，取15ml準備加入到免疫親和柱中過柱,。
l 將10ml注射器連接于免疫親和柱上端,。
l 處理好的樣品液15ml以1-2滴/秒的速度通過免疫親和柱，棄掉流出的液體,。
l 加10ml水淋洗柱子兩次,，棄掉流出的液體，
l 利用真空設(shè)備壓入空氣或用注射器吹干柱子中的水,。
l 加入1ml甲醇緩慢洗脫，流速約為2-3秒每滴,。
l 收集全部洗脫液于干凈的比色皿或其他容器中用于檢測,。
7 操作流程圖
8 液相色譜測定條件
● 激發(fā)/發(fā)射波長：360nm/440nm
● 流動相：甲醇-水（45+55）
● 流速：0.8mL/min
● 進樣量：20ul
● 柱溫：30°C
● 反應(yīng)時間：10min
用進樣器吸取20µL黃曲霉毒素標準工作液注入HPLC
色譜儀,，在上述色譜條件下測定標準溶液的響
應(yīng)值（峰高或峰面積）,，得到黃曲霉毒素B1,、B2,、
G1、G2標準溶液HPLC色譜圖
